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MTT檢測(cè)技術(shù)服務(wù)

簡(jiǎn)要描述:四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT方法),是通過快速簡(jiǎn)便的顏色反應(yīng)來檢測(cè)細(xì)胞存活數(shù)量。其原理是MTT可作為哺乳類動(dòng)物細(xì)胞線粒體中琥珀酸脫氫酶的底物。當(dāng)有活細(xì)胞存在時(shí),線粒體內(nèi)琥珀酸脫氫酶可將淡黃色的MTT還原成藍(lán)紫色的針狀甲月替(Formazan)結(jié)晶并沉積在細(xì)胞中,結(jié)晶物能被二甲基亞砜 (DMSO)溶解,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在570nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度OD值,OD值的高低可間接反映活細(xì)胞的數(shù)量及其活性。

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2024-05-13
  • 訪  問  量:4235

MTT細(xì)胞活性檢測(cè)服務(wù)

四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT方法),是通過快速簡(jiǎn)便的顏色反應(yīng)來檢測(cè)細(xì)胞存活數(shù)量。其原理是MTT可作為哺乳類動(dòng)物細(xì)胞線粒體中琥珀酸脫氫酶的底物。當(dāng)有活細(xì)胞存在時(shí),線粒體內(nèi)琥珀酸脫氫酶可將淡黃色的MTT還原成藍(lán)紫色的針狀甲月替(Formazan)結(jié)晶并沉積在細(xì)胞中,結(jié)晶物能被二甲基亞砜 (DMSO)溶解,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在570nm波長(zhǎng)處測(cè)定其吸光度OD值,OD值的高低可間接反映活細(xì)胞的數(shù)量及其活性。

MTT法常用的研究:

1、檢測(cè)細(xì)胞活性:常作為細(xì)胞毒性試驗(yàn)的一種方法。

2、體外藥物敏感實(shí)驗(yàn):該方法簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)、快速,重復(fù)性好,所需的細(xì)胞數(shù)較少,沒有放射性,目前廣泛的用于臨床前的抗癌藥物的篩選研究。

3、一些細(xì)胞因子活性的研究

實(shí)驗(yàn)步驟:

1)將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用胰酶消化后配制成濃度為1-10×104個(gè)/ml的細(xì)胞懸液,按1000-10000個(gè)細(xì)胞/孔接種于96孔板,每孔加100μl。

2)將平板置37℃、 5%CO2濕度培養(yǎng)箱中24小時(shí)后,加入含有不同濃度受試樣本的培養(yǎng)液100μl,每個(gè)樣本不同濃度設(shè)平行的三個(gè)孔,對(duì)照組加不含樣本的培養(yǎng)液100μl,再放入培養(yǎng)箱中孵育24-72 小時(shí),

3)用快速翻板法倒掉培養(yǎng)液,每孔加入用無血清1640按5mg/ml新鮮配制的MTT溶液100μl,溫育4小時(shí),使MTT還原為甲 月替,再次倒掉上清液,每孔加DMSO(二甲基亞楓)200μl,用平板搖床搖勻后,使用酶標(biāo)儀測(cè)定光密度值(OD)(參考波長(zhǎng)450nm,檢測(cè)波長(zhǎng)570nm),以溶劑對(duì)照處理細(xì)胞為對(duì)照組,按下述公式計(jì)算化合物對(duì)細(xì)胞的抑制率,并按中效方程計(jì)算半數(shù)抑制濃度IC50:

客戶方需提供:

樣本描述,相關(guān)的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)內(nèi)容如作用時(shí)間和樣本濃度等。

公司方提供:

實(shí)驗(yàn)結(jié)果IC50值。

實(shí)驗(yàn)周期與費(fèi)用:

實(shí)驗(yàn)費(fèi)用以樣本數(shù)和細(xì)胞株的種類數(shù)目為單位計(jì)算,實(shí)驗(yàn)周期為18個(gè)工作日,公司將在材料和預(yù)付的實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)全部到位后25個(gè)工作日之內(nèi)提交實(shí)驗(yàn)結(jié)果??蛻粜柙谑盏綄?shí)驗(yàn)結(jié)果后一周內(nèi)付清所有剩余款項(xiàng)。

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